近年來,隨著自由基研究的深入,自由基與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān),自由基的致癌作用已被肯定[1],作者對30例正常人,25例口腔癌患者術(shù)前及術(shù)后7天血中脂質(zhì)過氧化物(LPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)的濃度進行測定,探討口腔癌患者血中自由基的變化,以及手術(shù)后由于體內(nèi)原發(fā)灶的去除,血中自由基的濃度變化情況,探討體內(nèi)自由基與口腔腫瘤及其預后的關(guān)系。
1 材料與方法
1.1 病例選擇
腫瘤組25例,取自福建醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院口腔頜面外科住院患者,經(jīng)病理證實11例為牙齦鱗癌,9例為舌鱗癌,5例頰粘膜鱗癌,均手術(shù)切除原發(fā)灶并行單例選擇性頸淋巴結(jié)清掃術(shù),術(shù)后病理證實3例有頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。其中男性17例,女性8例,年齡47±11.74歲(30~61歲)。對照組30例,取自供血者及健康體檢者(經(jīng)心電圖、血脂、血糖、肝腎功能、胸透等檢查均為正常,且近期內(nèi)無服用硝酸甘油等藥物史)。
1.2 方法
LPO測定:TBA比色法[2],以nmol/ml表示。SOD測定:PyrogallolnBT比色法[3],以U/gHb表示。NO測定:用NO-2/nO-3的測定方法[4],以μmol/L表示。
1.3 統(tǒng)計學處理
實驗結(jié)果以平均值±標準差表示,組間差別用t檢驗。
自由基致促癌機理研究認為,由于各種因素(如輻射、外來化學物質(zhì)代謝、細胞色素電子傳遞鏈)和氧化酶活性的誘導增加,細胞內(nèi)過氧化物酶體的誘導增多,以及抗氧化防御系統(tǒng)的抑制都可以導致細胞內(nèi)自由基和活性氧的增加,過多的自由基、活性氧可以和細胞內(nèi)許多重要的生物分子作用,如核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和糖類等,造成結(jié)構(gòu)和功能的改變,由此引起和促進腫瘤的發(fā)生和發(fā)展[5]。筆者以口腔癌患者血中及術(shù)后血中自由基相關(guān)項目測定進行比較,探討自由基在口腔癌術(shù)前術(shù)后的變化。
3.1 LPO是體內(nèi)自由基引發(fā)不飽和脂肪酸鏈式反應的產(chǎn)物
有人認為,外源性毒物、藥物間接引發(fā)脂質(zhì)過氧化作用[6]。口腔位于消化道起始端,是首先接觸外源性毒物的器官,由于銳利牙尖、殘冠、不良修復體等慢性刺激長期存在,引起局部炎癥甚至癌變,或由于熱刺激、外來化學剌激等,化學致癌物進入體內(nèi)引起自由基增加,使脂質(zhì)過氧化增強,脂質(zhì)過氧化物增高。本組結(jié)果表明,口腔癌患者血中LPO明顯高于正常人,但術(shù)前與術(shù)后比較,并無顯著差異,提示口腔癌病灶切除后短期內(nèi)體內(nèi)LPO變化不顯著。
3.2 SOD是體內(nèi)清除超氧陰離子(O-2)的抗氧化酶之一
活性氧中的O-2是氧的單電子還原物,是自由基,體內(nèi)在清除O-2中,SOD起重要作用??谇话┗颊哐蠸OD濃度下降,反映了機體清除自由基的作用減弱,從而導致自由基引發(fā)不飽和脂肪酸鏈式反應產(chǎn)物――脂質(zhì)過氧化物的增加,這一結(jié)果與其他惡性腫瘤研究的結(jié)果一致。有研究指出,SOD增高與O-2自由基濃度有關(guān),SOD合成受O-2濃度影響,機體內(nèi)的腫瘤不同,SOD濃度也不同,但均明顯低于正常人[7]。
3.3 NO是一種分子小、結(jié)構(gòu)簡單的氣體
極易通過細胞膜擴散,由于分子中存有一對未配對的電子,具有自由基結(jié)構(gòu)。NO自由基來自體內(nèi)以L-精氨酸為底物,在NO合成酶(NOS)作用下,在還原型輔酶Ⅱ(NADPH)及黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)、黃素腺嘌呤單核苷酸(FMN)等因子協(xié)助下生成。NOS在哺乳動物中廣泛表達,不少腫瘤細胞中同樣存在NOS。NOS的活性變化可直接影響NO的生成量和生物效應。大量研究表明,在一些原發(fā)性腫瘤中,NOS活性與腫瘤的惡性程度呈正相關(guān),而惡性程度高的腫瘤表達也最高[8]。但也有文獻報道:人結(jié)腸癌和結(jié)腸息肉的NOS表達活性普遍處于抑制狀態(tài)[9]。本組結(jié)果表明,正常人組NO高于腫瘤病人組,說明口腔癌患者NOS的表達與結(jié)腸癌相似,可能處于抑制狀態(tài)。提示NOS在不同動物及組織間存在著差異,NOS的異常表達以及NO的生成可能與這些腫瘤的病理過程有關(guān)。而術(shù)后NO濃度水平較術(shù)前低,提示是否與術(shù)后急性損傷造成內(nèi)源性NO生成減少有關(guān)??谇话┭錘O濃度的變化及其在口腔腫瘤的發(fā)生發(fā)展中的作用有待進一步研究,本組測定結(jié)果可供同道們參考。